方唯意,江庆萍,刘 真.2D-PAGE电泳和质谱分析筛选鼻咽癌中NESG1调控蛋白[J].中国肿瘤,2012,21(7):525-528. |
2D-PAGE电泳和质谱分析筛选鼻咽癌中NESG1调控蛋白 |
2D-PAGE Electrophoresis and Mass Spectrography Screening for NESG-Regulated Protein in NPC |
投稿时间:2012-04-09 |
DOI: |
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中文关键词: 鼻咽癌 NESG1 蛋白质组学 双向凝胶电泳 |
英文关键词: |
基金项目:国家自然科学基金(81071632);广州市珠江科技新星计划 (2011J2200009);广东省育苗工程计划(LYM11102) |
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中文摘要: |
摘 要:[目的] 利用蛋白质组学筛选抑癌候选基因NESG1在鼻咽癌中可能调控蛋白。[方法] 提取NESG1稳定高表达的鼻咽癌3D8和对照鼻咽癌C6细胞蛋白,并采用双向凝胶电泳( 2D-PAGE)技术进行有效分离,图像扫描后获得高分辨率的2D-PAGE图谱。选用差异蛋白质组学技术筛选差异蛋白位点,然后用肽质量指纹谱(PMF) 和数据库检索技术给予鉴定。荧光定量PCR和Western Blot验证差异基因表达水平。[结果] 质谱分析显示,PKM2、ERO1L和BCAS2在NESG1过表达的3D8细胞中表达下调,其下调倍数分别为-5.25,-3.65和-4.52倍。荧光定量PCR在mRNA水平验证了PKM2、ERO1L和BCAS2(-3.65、-3.42和-4.55倍)以及Western Blot在蛋白水平验证了PKM2和ERO1L蛋白在3D8细胞中表达下调。[结论] PKM2、ERO1L和BCAS2可能是NESG1调控的靶基因,参与了NESG1介导的鼻咽癌生长抑制。 |
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